本发明公开了一种牛乳头状瘤病毒13型抗体的间接ELISA检测方法，步骤包括：步骤1、构建重组表达质粒pET28a?L1，以BPV13基因组为模板，针对BPV13衣壳蛋白L1基因序列设计特异性引物；通过PCR反应得到目的片段，对原核表达载体pET28a和目的片段同时双酶切，连接后得到重组表达质粒pET28a?L1；步骤2、对目的蛋白进行表达及纯化；步骤3、建立BPV13抗体的间接ELISA检测体系，针对BPV13L1蛋白样本阴阳性临界值，进行判定。本发明的方法，步骤简单，准确率高。