本发明属于医药技术领域，涉及一种抗生素类药物化合物杂质的精制方法，具体涉及美洛西林钠杂质A的分离制备方法，本发明公开的美洛西林钠杂质A的分离制备方法，包括以下步骤：以美洛西林钠为原料，与碱试剂反应制得美洛西林钠杂质A。本发明的技术方案通过美洛西林钠与碱溶液、酸溶液和无机盐在室温条件下，过滤洗涤干燥获得美洛西林钠杂质A。本发明还提供了分离纯化美洛西林钠杂质A的精制方法，制得杂质A纯度大于95％，可应用于对照品研究，属于医药领域。