本发明提供一种透明质酸中邻苯二甲酸酯塑化剂残留的检测方法，其包括：制样步骤，利用无水乙醇和塑化剂的标准品，经过过滤，制备塑化剂的标准品溶液，利用无水乙醇提取透明质酸中的塑化剂，进行过滤、浓缩，制作供试品溶液，无水乙醇经过滤作为空白溶液；和检测步骤，使用高效液相色谱检测所得到的供试品溶液、标准品溶液和空白溶液，使用外标法确定塑化剂的残留量。本发明的方法简便易行，不需使用质谱，降低了检测成本，准确度高，检测限不高于0.06mg/kg。