本发明提供了表达L‑谷氨酸氧化酶和过氧化氢酶的重组载体、工程菌及应用与α‑酮戊二酸的生产方法，属于分子生物技术及酶工程领域。本发明提供的表达L‑谷氨酸氧化酶和过氧化氢酶的重组载体，通过在载体中插入调控所述L‑谷氨酸氧化酶基因LGOX和过氧化氢酶基因CAT表达的调控序列SD，提高L‑谷氨酸氧化酶和过氧化氢酶转化底物生成α‑酮戊二酸的能力，具有较好的实际使用价值。