本发明公开了一种凝结芽孢杆菌产抑菌活性物质的方法，属于微生物技术领域。本发明采用一株保藏于中国普通微生物菌种保藏中心(CGMCC)的编号为1.949的凝结芽孢杆菌菌株，通过调整培养基和培养条件，抑菌多肽含量由原来的1.507mg/mL提高为2.846mg/mL，以金黄色葡萄菌作为指示菌，其抑制效果与0.5mg/mL的氨苄青霉素以及0.05mg/mL的硫酸卡那霉素作用效果相当。提高凝结芽孢杆菌产抑菌活性物质的能力，可以应用于食品防腐剂，保鲜剂或利用其抑制病原微生物生长的特性应用于医药保健领域。