本发明公开了一种芽孢杆菌DL‑2的胞外蛋白酶在催化(±)‑乙酸苏合香酯不对称水解中的应用。本发明从西太平洋深海分离到一株芽孢杆菌Bacillus sp.DL‑2，发酵培养制备其胞外蛋白酶，用硅藻土固定化后能够催化(±)‑乙酸苏合香酯不对称水解，可用于制备手性(R)‑1‑苯乙醇和(S)‑乙酸苏合香酯。本发明利用固定化的胞外蛋白酶作为催化剂，对反应体系和反应条件进行优化，制备得到了光学纯度约为97％的(R)‑1‑苯乙醇和光学纯度大于99％的(S)‑乙酸苏合香酯。本发明的Bacillus sp.DL‑2的胞外蛋白酶具有生产工艺简单、催化效率高的优点，在生物医药和精细化工领域具有非常大的应用前景。