一种检测脂肪酰胺水解酶的荧光探针及其应用，其属于生物医药技术领域。它可用于测定不同来源生物体系中脂肪酰胺水解酶的酶活性。以THPO作为特异性探针反应底物，借助脂肪酰胺水解酶体外反应体系，通过定量检测单位时间内苷元代谢产物的生成量来测定各生物样品中脂肪酰胺水解酶的活性。本发明可用于不同个体来源人和动物组织样本、不同种属细胞及细胞制备物、以及各种植物和微生物中脂肪酰胺水解酶活性的定性、定量测定，并可实现对脂肪酰胺水解酶处置药物能力的评估，以及脂肪酰胺水解酶抑制剂的开发筛选。