本发明涉及一种去除生物样品中无细胞核红细胞的裂解试剂以及在DNA提取中的应用。该去除红细胞的裂解试剂包含金属离子螯合剂、无机盐、表面活性剂以及溶液缓冲体系。本发明还提供了所述裂解试剂在DNA提取中的应用方法。采用本发明提供的无核红细胞裂解试剂，克服了现有产品稳定性差、需要冷藏保存以及取出需要预热使用的缺点，可有效裂解去除人、鼠等血液样品或组织细胞样品中的红细胞，并分离富集样品中的有核细胞，用于有核细胞的核酸(DNA)提取，具有试剂组分稳定、安全环保，红细胞裂解效率高、操作快速简便的优点；试剂能在常温长期储存、无需冷链运输，配制和使用成本均较低。