中华乌塘鳢卵黄蛋白原重组表达及纯化方法，涉及融合蛋白表达纯化方法技术领域，提供一种基于中华乌塘鳢卵黄蛋白原基因，克隆其部分基因并体外重组质粒，转入大肠杆菌进行原核表达，IPTG诱导温度为16℃条件下获得高效融合表达，并且表达目的蛋白以可溶性状态存在，目的蛋白占细菌可溶性蛋白总量25％以上。应用纯化技术获得融合蛋白MNP‑VTG，通过蔗糖酶酶切将标签MNP从融合蛋白中分离获得目的蛋白VTG单体。该方法表达高效纯化VTG简便，因是可溶性，分离比包涵体简单，无需复性。获得的重组VTG为后续应用提供了稳定均一的原料基础。给重组蛋白可以用于生物活性功能研究，亦可以制备相应抗体开展检测研究。