本发明公开了一种柱前衍生化高效液相色谱法来分离检测依折麦布关键中间体A及其对映异构体的方法。该方法采用在有机醇溶液中，使用一定浓度的酸性溶液对依折麦布关键中间体A和其对映异构体进行脱去三甲基硅基保护基的反应，反应一定时间后，经简单后处理即得到脱去保护基的衍生化产物。衍生化后的依折麦布关键中间体A及其对映异构体可以采用以手性填料为固定相的高效液相色谱法进行分离检测。