本发明提供了一种注射用阿扎胞苷冻干粉针，原料按重量份配方比包括：2～8份阿扎胞苷、2～8份甘露醇、100～300份乙腈和684～896份水。还提供了注射用阿扎胞苷冻干粉针的制备方法：在配液罐中加入部分注射用水；加入重量份为100～300份乙腈，搅拌至澄清；加入重量份为2～8份的甘露醇，搅拌至完全溶解，并降温至0～4℃；称取已预微粉化的重量份为2～8份的阿扎胞苷原料药，使用部分剩余注射用水润洗后，加入配液罐，并剧烈搅拌至溶解，加入注射用水定容至1000份；除菌过滤, 灌装, 冻干后, 得制剂产品。可有效控制产品的粒径和总杂质水平，产品的溶出曲线等生物等效性指标与原研品相当，总杂质水平优于原研品。