本发明公开了一种细胞核DNA染色方法，由以下步骤组成：配制AF固定液、水解液、漂洗液以及伊红染色液；配制细胞DNA染色液；细胞DNA染色液由体积比为1∶1的细胞DNA染色液A和细胞DNA染色液B组成；将病理样本放入AF固定液中固定；流水清洗后，放入水解液中水解；流水清洗后，放入细胞DNA染色液中染色；流水清洗后，放入漂洗液中漂洗；乙醇逐级脱水，放入伊红染色液，无水乙醇脱色，晾干、封片。本发明染色时间大大缩短；水解液由非易制毒化学品组成，属于环境友好型试剂；AF固定液较以往的固定液，不含乙酸，对人体刺激小；细胞DNA染色液配制简单，无需加热煮沸，有效期长于18个月，即用型，适于商业推广。