本发明公开了一种马来酸水合酶突变体，其氨基酸序列为SEQ ID NO : 3，与野生型马来酸水合酶相比，显著提高了催化马来酸一步水合反应生成D‑苹果酸的酶活力。采用表达该马来酸水合酶突变体的全细胞催化100g/L马来酸底物反应生成D‑苹果酸时，产物光学纯度超过99％，具有工业化开发应用前景。