本发明属于生物材料技术领域，涉及一种柞蚕丝素短纤维的制备方法，将柞蚕茧壳脱胶处理得到柞蚕丝素纤维，再用FeCl3溶液水解处理柞蚕丝素纤维，制备得到柞蚕短纤维。本发明的制备方法简单易控、条件温和，反应水解试剂对柞蚕丝素表面无明显破坏；通过本发明得到柞蚕丝素短纤维的水解率较高，且得到的柞蚕短纤维长度主要分布在100～250μm，形状为细长的短杆状，两端的切口平整，具有很好的提高丝素膜拉伸性能的潜力，在医疗及化妆品领域具有潜在的应用价值。