本发明公开了一种甜菊糖甙RB的提纯方法，具体涉及植物提纯技术领域，包括以下步骤：步骤一，取甜菊糖甙母液，将母液倒入至坩埚内，并向坩埚内添加氧化钙粉末后搅拌均匀，静置1‑3小时，然后再向坩埚内添加2mol·L‑1的FeSO4溶液，搅拌均匀后，将其加热并浓缩至原质量的40%，获取A相溶液；步骤二，将蒸馏水浸泡好的阴离子交换树脂和阳离子交换树脂分别装入离子交换柱中，并按先阴离子后阳离子的顺序连接好装置。本发明提供的提纯方法，能够制得RB含量45%以上的甜菊糖甙，提供了以RB为主的甜菊糖甙产品，满足了消费者的不同需求，能够适应多样化的市场需求，备要求低，可操作性强，具有良好的社会推广应用。