本发明属于病毒核酸检测领域，具体涉及一种用于定量检测乙肝病毒的微滴数字PCR试剂盒及检测方法。本发明的微滴数字PCR试剂盒包括微滴数字PCR检测试剂，包括由SEQ ID NO : 1所示的正向引物、由SEQ ID NO : 2所示的反向引物、由SEQ ID NO : 3所示的探针；探针的两端标记有荧光基团。本发明微滴数字PCR试剂盒的特异性好、灵敏度高、能快速检测到极低含量的病毒，而且可直接定量，无需标准曲线。技术操作简便、自动化程度高，为低浓度乙肝病毒检测和定量提供了一种切实可行的方法。