本发明公开了一种高表达细胞色素P450单加氧酶赭曲霉菌株及其构建方法与其在以坎利酮为底物发酵生产11α‑羟基‑坎利酮中的应用。所述赭曲霉菌株现保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2019616，其重组片段包括细胞色素P450单加氧酶编码基因及其上、下游DNA序列，启动子，终止子和抗生素抗性基因；该基因片段与赭曲霉原始菌株MF018染色体中细胞色素P450单加氧酶基因发生同源重组。本发明将构建的高表达细胞色素P450单加氧酶基因与赭曲霉原始菌株MF018染色体上的细胞色素P450单加氧酶基因发生双交换得到。本发明能够实现发酵过程中生产11α‑羟基‑坎利酮的有效积累。