本发明属于生物医药基因工程与免疫学领域，具体涉及一种表达非洲猪瘟病毒CD2v蛋白的细胞株及其应用。本发明提供的表达非洲猪瘟病毒CD2v蛋白的细胞株，是通过对非洲猪瘟CD2v蛋白核酸序列进行优化合成，构建含ASFV‑CD2v基因的重组慢病毒载体，然后包装慢病毒并感染HEK‑293T细胞，再经筛选获得的。本发明提供的表达非洲猪瘟病毒CD2v蛋白的细胞株，具有与亲本细胞相似的生物特性，有利于抗原蛋白的规模生产；表达蛋白在表达细胞内能得到接近病毒蛋白的天然构象与修饰加工，抗原性好，易于大量生产。