本发明公开了一种重组鸡白痢沙门菌、制备方法及应用，属于动物细菌基因工程技术领域。重组鸡白痢沙门菌的名称为鸡白痢沙门菌C79‑13ΔcrpΔasd(pYA3493‑HN)，保藏编号：CCTCC NO : M 2015305，其表达的鸡新城疫病毒保护性抗原基因‑HN基因是鸡新城疫病毒重要的免疫原性基因片段，具有良好的免疫保护性。重组菌株衍生于鸡白痢沙门菌标准菌株C79‑13，完全保留了C79‑13针对鸡白痢沙门菌的免疫效力，且其毒力比C79‑13更弱，具有良好的生物安全性，可同时提供针对鸡白痢沙门菌和鸡新城疫两种病原的保护力。同时，该重组菌株不含抗性标记，完全符合疫苗生物安全性要求。