一种食源致病微生物快速检测用Toehold结构及其应用，属于分子生物学技术领域。一方面本发明公开了十种食源致病微生物的快速检测用Toehold结构，其序列如SEQ ID No.1‑60所示，另一方面本发明公开了十种食源致病微生物的快速检测用Toehold结构的用途。与现有方法相比，本发明操作简单、检测精度高、结果准确、价格低廉、检测限低(fM级别)、检测样本量大(同时检测上百样品)、时间短(整个过程2‑3小时)。